期刊简介

               本刊系中国免疫学会会刊,创刊于1985年,由中国免疫学会主办,中国科协主管。本刊宗旨是为我国科研机构、高等院校及医药单位的免疫学工作者及相关工作人员服务,报道我国免疫学科最新研究成果,交流各分支学科间工作经验,介绍国内外免疫学科发展动态,推动我国免疫学科研、教学事业的发展。主要栏目设置有分子与细胞免疫学、遗传免疫学、肿瘤免疫学、抗感染免疫学、中医中药与免疫、移植免疫学,生殖免疫学、神经内分泌与免疫、兽医免疫学、临床免疫学、免疫学技术与方法、教学园地、述评、专题综述等,跟踪国内外免疫学研究的重点、热点、前沿等课题,组织专题讲座等。                

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  • 杂志名称:中国免疫学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国免疫学会,吉林省医学期刊社
  • 国际刊号:1000-484X
  • 国内刊号:22-1126/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊方阵双效期刊期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国免疫学杂志2016年第10期

人Cosmc胞外段蛋白在昆虫细胞Sf-9中的表达与纯化研究

谢秋玲;陶悦;张小秦;莫茜;金燕樑

关键词:人Cosmc 胞外段, 昆虫细胞, 杆状病毒表达系统, 表达纯化
摘要:目的::利用昆虫细胞Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达人Cosmc胞外段蛋白,为体外研究Cosmc蛋白的结构和功能奠定基础,同时也为 O-连接糖基化及相关疾病的研究提供思路。方法:采用 Bac-to-Bac 系统,构建重组转移质粒pFastBac1-Cosmc extracellular domain(pFastBac1-Cosmc ED),转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组转座子rBacmid-Cosmc ED。在脂质体介导下,重组病毒感染Sf-9无血清细胞,在Sf-9中表达Cosmc 胞外段蛋白,由于Cosmc N端加有昆虫细胞信号肽HBM( Honey Bee Melittin)且不含有跨膜段,所以Cosmc胞外段蛋白表达后分泌到培养基上清中,通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行检测,并通过Ni-NTA亲和层析柱对其进行纯化分析。结果:SDS-PAGE和Western blot分析显示得到一条分子量约为33 kD的特异性条带,与目的蛋白大小相符,质谱结果进一步证明所得蛋白为Cosmc胞外段蛋白。结论:Sf-9细胞中可成功表达Cosmc胞外段蛋白,为进一步研究Cosmc的结构和功能奠定基础。